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低聚半乳糖新國標(biāo)-檢測(cè)結(jié)果

 更新時(shí)間:2024-06-11 點(diǎn)擊量:1563

低聚半乳糖(GOS)是一種常見的功能性低聚糖,可作為益生元添加到食品中,也可以作為保健品使用。目前低聚半乳糖的新國標(biāo)GB5009.289-2023《食品中低聚半乳糖的測(cè)定》開始正式實(shí)施。

由于低聚半乳糖沒有紫外吸收基團(tuán),一般檢測(cè)方法是使用通用性檢測(cè)器,但靈敏度較差,因此常會(huì)選擇對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行衍生后檢測(cè)。2-氨基苯甲酰胺因?yàn)榫哂休^強(qiáng)的熒光信號(hào),被廣泛的應(yīng)用于還原性糖衍生檢測(cè)。在色譜分析中對(duì)于糖類的檢測(cè)主要差異是親水作用力,所以常選擇親水模式進(jìn)行分離。基于以上原理,GB5009.289-2023采用2-氨基苯甲酰胺作為衍生劑,使用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)。

參照GB5009.289-2023要求,使用S6000高效液相色譜搭配和曦科技Morphling HILIC-Amide色譜柱進(jìn)行食品中低聚半乳糖的測(cè)定,

分析條件

儀器:S6000 FL

色譜柱:和曦科技Morphling HILIC-Amide, 4.6 × 150 mm, 5 μm, 100 ?

流動(dòng)相:A:甲酸銨溶液,B:乙腈

柱溫:30 ℃

激發(fā)波長:355 nm

發(fā)射波長:430 nm

流速:1.0 mL/min

進(jìn)樣量:20 μL

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

前處理方法

稱取1.0 g試樣,用水定容至50 mL并混勻,作為試樣液。

吸取20 μL試樣液,加入200 μL 2-氨基苯甲酰胺衍生溶液,渦旋混勻,在60 ℃水浴中保溫120 min,放至室溫后,加入1 mL乙酸銨溶液(0.2 mol/L,pH=4.50)渦旋混合。移取0.5 mL混合溶液,加入200 μL淀粉葡糖甘酶溶液(180 U/mL),50 ℃水浴保溫30 min。放至室溫后,加入0.7 mL乙腈,混勻后6000 r/min離心5 min,上清液用0.22 μm有機(jī)濾膜過濾后,待測(cè)。

使用同樣方法對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行衍生后,待測(cè)。

標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)

采用上述液相方法,對(duì)混合標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行衍生化后上機(jī)檢測(cè)。結(jié)果如下圖所示,結(jié)果表明,7種化合物峰形較好,分離度滿足要求。

image.png 

1  7種標(biāo)準(zhǔn)溶液衍生物色譜圖

A:空白溶液;B:混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液)

1 麥芽糖衍生物、2 乳糖衍生物、3 麥芽三糖衍生物、4 麥芽四糖衍生物、5 麥芽五糖衍生物、6 麥芽六糖衍生物、7 麥芽七糖衍生物)

結(jié)論

采用S6000高效液相色譜儀搭配和曦科技Morphling HILIC-Amide( 4.6 × 150 mm, 5 μm, 100 ?)色譜柱進(jìn)行食品中低聚半乳糖檢測(cè),各化合物分離度、線性、靈敏度均滿足GB 5009.289-2023《食品中低聚半乳糖的測(cè)定》的要求。


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